|
|
Ферменты
-
ДНК-зависимая РНК-полимераза Т7
Описание: рекомбинантная форма, выделенная из E. coli
Условия хранения: 20 мМ К-фосфат рН 7.5, 0.1 мМ ЭДТА, 0.1 мМ ДТТ, 20 мМ КCl, 50% глицерин. Хранить при -20° С.
Определение единицы активности: за единицу активности РНК-полимеразы Т7 принимали количество фермента, катализирующее включение 1 нмоль нуклеозидтрифосфата в кислотонерастворимый продукт за 1 час при 37° С.
Условия реакции: 40 мМ трис-HCl рН 8.1, 16 мМ MgCl2, 2 мМ спермидин - НСl 10 мМ дитиотрейтол, 4 нуклеозидтрифосфата в концентрации 1 мМ каждый, 10 мкг/мл плазмиды, содержащей Т7 промотор.
-
Т4 ДНК-лигаза
Описание: рекомбинантная форма, выделенная из E. сoli
Буфер хранения: 10 мМ трис-HCl рН 7.4, 50 мМ KCl, 0.1 мМ ЭДТА, 1 мМ дитиотрейтол, 50% глицерин.
Определение единицы активности: одна единица активности соответствует количеству фермента, необходимому для лигирования 50% Hind III фрагментов ДНК фага l за 30 мин при 16°С в 20 мкл реакционной смеси при концентрации ДНК 300 мкг/мл.
Условия реакции: 50 мМ трис-HCl рН 7.5, 10 мМ MgCl2, 10 мМ дитиотрейтол, 1 мМ ATP. Оптимальная температура лигирования 16°С.
-
Taq ДНК-полимераза
Описание: рекомбинантная форма, выделенная из E. сoli
Буфер хранения: 50 мМ трис-HCl, pH 8,0 (при 25°С), 50 мМ NaCl, 0,1 мМ ЭДТА, 1мМ дитиотрейтол, 50 % глицерин и 1 % Тритон Х-100.
Определение единицы активности: за единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 10 нмоль dNTP в кислотонерастворимый продукт за 30 мин при 74°С.
Условия реакции: 50 мМ трис-HCl, pH 9,0 (при 25° С), 50 мМ NaCl, 10 мМ MgCl2, 200 мM dATP, 200 мM dCTP, 200 мM dGTP, 50 мM [3H] dTTP, 0,25 мг/мл активированной ДНК из тимуса теленка.
-
Обратная транскриптаза МоМLV
Описание: рекомбинантная форма, выделенная из E. coli, не содержит доменa РНКазы Н
Буфер хранения: 50 мМ трис-HCl, pH 8,0 (при 25°C ), 100 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА, 5 мМ дитиотрейтол, 50 % глицерин и 0,1 % NP-40.
Условия определения активности: 50 мМ трис-HCl, pH 8,3 (при 25°С), 40 мМ KCl, 6 мМ KCl, 50 мM [3H] dTTP, 1 мМ дитиотрейтол, poly А 2 А260/мл, 2 мкМ d(pT)12, 100 мкг/мл БСА .
Определение единицы активности: за единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 1 нмоль dTMP в кислотонерастворимый продукт за 10 мин при 37°С.
-
Т4 полинуклеотидкиназа
Описание: рекомбинантная форма, выделенная из E. coli
Буфер хранения: 10 мМ трис-HCl рН 7.4, 50 мМ KCl, 0.1 мМ ЭДТА, 1 мМ дитиотрейтол, 50% глицерин.
Условия определения активности: 70 мМ трис-HCl рН 7.6, 10 мМ MgCl2, 5 мМ дитиотрейтол, 66 мкМ [g32Р] АТФ, 20 мкМ 18-20 - мерный гетеродезоксиолигонуклеотид.
Определение единицы активности: одна единица активности соответствует количеству фермента, катализирующему включение 1 нмоль [32Р] в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при 37°С.
-
Урацил-ДНК-гликозилаза
Описание: рекомбинантная форма, выделенная из E. coli
Буфер хранения: 10 мМ трис-HCl рН 7.4, 150 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА, 1 мМ дитиотрейтол, 50% глицерина. Хранить при -20°С.
Определение единицы активности: одна единица активности катализирует деградацию 1 мкг одноцепочечной урацил-содержащей ДНК при 37°С за 60 мин.
Условия реакции: 20 мМ трис-HCl рН 8.2, 1 мМ ЭДТА, 10 мМ NaCl, 1 мкг урацил-содержащей ДНК.
| |
|
| Адрес: |
Россия, 630090, г. Новосибирск, пр. ак. Лаврентьева, 8 |
| Тел./Факс: |
+7 383 332-05-02 |
| |
|
| Директор: |
Рихтер Владимир Александрович |
| Сайт: |
http://www.biosan-nsk.ru/ |
| E-mail: |
 |
|
